Contenido

• Al paso
• Parte 1 de 2: Verificación de la calibración
• Parte 2 de 2: Calcular los resultados

Una pipeta es un tipo de equipo de laboratorio que se utiliza para medir y transferir cantidades muy pequeñas de líquido. La exactitud y precisión en la medición de la pipeta son necesarias porque cualquier desviación en los volúmenes suministrados puede afectar los resultados de un experimento. Para garantizar la precisión, es necesario comprobar la calibración de la pipeta cada pocos meses. El proceso de calibración ayuda a verificar que el equipo esté dispensando los volúmenes correctos para que se pueda restaurar si no es así.

Al paso

Parte 1 de 2: Verificación de la calibración

1. Reúna los materiales necesarios. Para verificar la calibración de una pipeta, necesita una pipeta, puntas de pipeta, agua destilada, un vaso de precipitados, un termómetro, una balanza y platos. La balanza debe ser específica para microgramos para calibrar micropipetas con un máximo de 1 µl.
   • No necesitas más de 5 ml de agua. Llena la taza con agua.
   • Asegúrese de que las puntas de las pipetas encajen correctamente.
2. Mide la temperatura del agua destilada. Coloque el termómetro en el agua y déjelo reposar durante al menos un minuto. Si la línea roja del termómetro aún se mueve, déjela por otro minuto. Después de un minuto, anote la temperatura en un cuaderno. Retire el termómetro y séquelo cuando haya terminado.
   • La temperatura del agua es importante para los cálculos realizados para verificar la calibración.
3. Coloque la balanza en la balanza y ajústela a cero. Lo ideal es utilizar una balanza con puertas y una habitación aislada. Coloque el recipiente en la habitación y cierre las puertas. Si no hay puertas, simplemente coloque el cuenco en la balanza. Presione el botón "Cero" o "Tara" y espere a que la balanza lea cero.
   • Al poner la balanza a cero, no se tiene en cuenta el peso del recipiente de plástico y es posible medir solo el peso de lo que se pone en el recipiente.
4. Prepare la pipeta para la calibración. Antes de comenzar, limpie la pipeta con etanol para eliminar cualquier contaminante; además, asegúrese de que la punta de la pipeta no se obstruya. Coloque la punta correcta en el extremo y configure el volumen que desea probar.
   • Antes de la calibración, prueba tanto el volumen más pequeño como el más grande que puede dispensar la pipeta.
5. Enjuague la punta antes de calibrar. Presione el botón hasta el primer tope e inserte la punta en el agua destilada de modo que aproximadamente 2 mm se sumerjan en el líquido. Suelte el botón para extraer un poco de líquido, luego dispense el líquido nuevamente presionando el botón hacia abajo. Repita esto tres veces para enjuagar la punta.
   • Presione el botón hasta el segundo tope para dispensar cualquier líquido restante en la punta y retire la pipeta del agua.
6. Dibuja el volumen de calibración. Con la punta fuera del líquido, presione el botón hasta el primer tope. Coloque aproximadamente 2 mm de la punta en el agua destilada y suelte el botón para extraer el líquido hacia la punta. Espere un segundo antes de sacar la punta del agua.
   • Asegúrese de que la punta esté completamente sumergida durante todo el proceso de aspiración. No quieres burbujas en la punta o el resultado no será el correcto.
7. Dosifique el líquido en el recipiente en la balanza. Coloque la punta contra el fondo del recipiente y presione el botón hasta el primer tope. Muévase a otro lugar, ligeramente alejado del agua, y presione el botón hasta la segunda parada. Mantenga presionado el botón y levante la punta del bol.
   • Mantenga la punta en la pipeta, porque la volverá a utilizar para realizar más pruebas de calibración. Asegúrese de que la punta no toque nada.
8. Registre el peso que indica el saldo. Cierre la puerta si está usando una balanza en una habitación aislada. Espere a que los valores dejen de cambiar. Registre este valor en su cuaderno.
   • Es importante esperar a que el número se estabilice antes de escribirlo. Tus lecturas serán incorrectas si no esperas.
9. Repita este proceso hasta que haya tomado al menos 10 medidas. Ponga la balanza a cero, enjuague la punta, extraiga el mismo volumen, dispense el volumen y luego registre el peso. Necesita varias grabaciones del mismo volumen y luego puede tomar el promedio de todas las grabaciones juntas.
   • Puede repetir este mismo proceso con diferentes volúmenes, siempre que tome varias medidas por volumen.

Parte 2 de 2: Calcular los resultados

1. Utilice la fórmula para el volumen calculado. La fórmula para calcular el volumen entregado por la pipeta es V = w * Z, donde w es el peso del agua, Z es el factor de conversión basado en la densidad del agua y V es el volumen calculado de la cantidad de agua se entrega.
   • Puede encontrar la variable Z buscando la densidad del agua usando la temperatura registrada al comienzo del experimento.
   • Por ejemplo: si la temperatura del agua era de 23 ° C, entonces asume un valor Z de 1,0035 µg / mg.
2. Calcule la media de las pruebas repetidas. Debe haber pesado el volumen de agua dispensado por la pipeta al menos 10 veces. Para calcular la media de todos estos valores, súmelos y divídalos por 10. Si ha realizado más o menos ensayos, sume cada ensayo y divida la suma por el número total de ensayos.
   • Por ejemplo: Los diez pesos que registró para un volumen de pipeta de 10 µl son los siguientes: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 y 9,98.
   • La media es: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Aplica las variables a la ecuación y resuélvela. Una vez que determine los valores correctos para cada variable, puede incorporarlos a la ecuación y resolver el volumen calculado. Para resolver esto, simplemente multiplique el peso promedio de todos los valores de prueba por el valor Z.
   • Por ejemplo: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
4. Calcule la precisión de la pipeta. Para calcular la precisión, puede usar la ecuación A = 100 x V._promedio/ V₀ donde A es la precisión de la pipeta, V._promedio el volumen medio calculado, y V.₀ el valor que establezca para la pipeta. La precisión debe estar entre 99 y 101%.
   • Si la pipeta está calibrada correctamente, el valor calculado debe estar muy cerca del valor real que estableció en la pipeta.
   • Por ejemplo: A = 100 x V_promedio/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Esta pipeta está debidamente calibrada.
5. Envíe la pipeta para su calibración, si es necesario. Si su pipeta no pasa la prueba de calibración, deje de usarla para experimentos inmediatamente. Las pipetas son piezas muy delicadas y costosas del equipo de laboratorio. No puede reparar la calibración usted mismo, por lo que tendrá que enviarla para un mantenimiento adecuado. Alternativamente, algunas empresas acudirán a su laboratorio y calibrarán sus pipetas allí.
   • Para mantenimiento, comuníquese con la compañía que fabrica su marca de pipeta específica.